Mesure de la déplétion extracellulaire en analogue du glucose fluorescent : une technique de mesure de substitution pour évaluer l’absorption du glucose dans les organes de souris ex vivo

Dans les tissus, le glucose extracellulaire pénètre dans les cellules via une diffusion facilitée par des transporteurs de glucose spécifiques.

Le glucose est décomposé en pyruvate dans le cytoplasme cellulaire via la glycolyse, une voie métabolique, générant de l’énergie sous forme d’adénosine triphosphate, ou ATP, pour les processus métaboliques cellulaires.

Pour mesurer l’absorption de glucose ex vivo, commencez par du tissu hépatique de souris de petite taille fraîchement récolté. Ajouter un tampon approprié pour maintenir les conditions physiologiques.

Ensuite, transférez le tissu dans une plaque multi-puits contenant un milieu sans glucose. Suivez-le par incubation dans un milieu sans glucose complété par du désoxyglucose, un analogue du glucose marqué par fluorescence. La petite taille du tissu permet l’entrée du désoxyglucose.

Le désoxyglucose pénètre dans les cellules par l’intermédiaire des transporteurs de glucose, en l’absence de glucose. À l’intérieur des cellules, le désoxyglucose subit une phosphorylation mais n’est pas métabolisé davantage, ce qui entraîne son accumulation.

Prélever le milieu contenant du désoxyglucose inutilisé marqué par fluorescence aux points te