Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
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La paroi de l’aorte est principalement composée de cellules musculaires lisses, ou SMC, contenant une machinerie protéique contractile qui se contracte et se détend pour réguler le flux sanguin aortique.
Pour mesurer la réponse contractile des CMS aortiques in vitro, obtenir une plaque multipuits contenant un réseau de capteurs ECIS (détection d’impédance cellule-substrat électrique). Chaque réseau contient des électrodes à film d’or au fond du puits, délimitées par un film isolant. Enduire les puits de gélatine.
Semez la suspension primaire de SMC humain dans les puits. Transférez la plaque de puits contenant l’ECIS vers un support de plaque connecté à un amplificateur et à un système d’acquisition de données tout en assurant le contact de l’électrode avec le support. Appliquez un petit courant alternatif constant entre les électrodes pour mesurer le potentiel à leurs bornes.
Pendant l’incubation, les CMS adhèrent et se propagent sur l’enrobage de gélatine. Les cellules se comportent comme des isolants, limitant le flux de courant entre les électrodes. Au fur et à mesure que de plus en plus de cellules se fixent à la surface, le flux de courant diminue davantage. En conséquence, l
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