Bioreporter Assay : une technique sensible utilisant un système de rapporteur bioluminescent pour détecter les anticorps du SARS-CoV-2

Lors d’une infection par le coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère, ou SRAS-CoV-2, le domaine de liaison au récepteur de la protéine de pointe du virus, RBD, se lie à l’enzyme de conversion de l’angiotensine 2 de la cellule hôte, ACE2, facilitant ainsi l’entrée dans les cellules virales. En réponse, le système immunitaire produit des anticorps qui se lient au RBD viral et empêchent l’entrée cellulaire, réduisant ainsi l’infectiosité virale.

Pour détecter les anticorps du SARS-CoV-2 ciblant le RBD, prenez une suspension de biorapporteur recombinant comprenant des fragments de protéines de petite taille, fusionnés à un RBD de spicule du SARS-CoV-2. Ajoutez des anticorps standard contre le SRAS-CoV-2 ciblant le RBD et des billes magnétiques de liaison aux anticorps.

Pendant l’incubation, la région de l’anticorps Fc se lie aux domaines de liaison Fc des billes. De plus, le biorapporteur recombinant se lie aux anticorps du SRAS-CoV-2 ciblant le RBD liés aux billes.

Après l’incubation, centrifuger le mélange. Retirer le surnageant non lié contenant le biorapporteur. Remettez les billes liées en suspension dans le tampon. Transférer dans une plaque multipuits.

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