Essai de co-incubation bactérienne : une technique basée sur la microscopie à fluorescence pour visualiser la compétition bactérienne intraspécifique au niveau de la cellule unique
Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:55 min • July 8th, 2025
La compétition intraspécifique entre deux souches bactériennes provoque la libération par la souche inhibitrice de molécules effectrices toxiques qui tuent la population cible.
Pour visualiser les interactions compétitives entre deux souches bactériennes à Gram négatif, il faut commencer par une co-culture comprenant un inhibiteur et une souche cible en quantités égales.
Les deux souches sont conçues pour exprimer des protéines fluorescentes de couleurs différentes afin de les différencier visuellement pendant l’imagerie. Concentrez la culture de manière à maximiser le contact de cellule à cellule entre les souches bactériennes. Placez la culture mixte sur une lamelle placée au fond d’un plat.
Placez un tampon d’agarose solidifié sur l’endroit, permettant aux bactéries de s’immobiliser, et couvrez-le d’une autre lamelle. Incuber pour permettre la croissance bactérienne, en simulant des conditions d’encombrement bactérien.
L’enveloppe cellulaire de la souche inhibitrice contient un système sécrétoire spécialisé - le système de sécrétion de type six, ou T6SS. Il est composé d’un complexe membranaire, d’une plaque de base et d’une chambre à air entourée d’une gaine contractile.
Lors d
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