Dosage des plaques virales : une technique pour mesurer le virus de l’herpès simplex infectieux par quantification des plaques formées dans une monocouche de cellules infectées par le virus

Pour commencer, préparez des dilutions en série du virus de l’herpès simplex, un virus infectieux enveloppé, en tampon.

Obtenez une plaque multipuits contenant une monocouche de culture de cellules épithéliales sensibles au virus. Remplacez un volume spécifique de milieu par des suspensions virales diluées, assurant une couverture monocouche uniforme. Laissez le virus s’adsorber à la surface de la cellule.

Supprimez tous les virus non adsorbés. Recouvrez la monocouche cellulaire d’un milieu contenant de la méthylcellulose, formant une couche semi-solide.

Lors de l’incubation, l’enveloppe virale et la membrane cellulaire fusionnent, libérant la nucléocapside virale renfermant le génome double brin dans le cytoplasme. De plus, le génome viral est libéré dans le noyau cellulaire.

En utilisant la machinerie cellulaire de l’hôte et la protéine du virion, le génome viral exprime des protéines virales précoces immédiates, qui régulent l’expression des gènes précoces. Les protéines virales précoces médient la réplication de l’ADN viral.

Ensuite, les gènes viraux tardifs expriment des protéines structurelles qui, avec le génome viral, s’assemblent pour produire des particules de virion de d