Test de luciférase pour étudier l’efficacité des produits chimiques antiparasitaires contre les parasites

Toxoplasma gondii – un parasite protozoaire – se reproduit exclusivement dans des cellules hôtes animales nucléées. Il envahit les cellules hôtes par le biais du processus endocytaire, formant une vacuole parasitophore. À l’intérieur de la vacuole, le parasite ingère les protéines cytosoliques de l’hôte, acquérant des nutriments pour la croissance.

Pour tester l’efficacité des produits chimiques antiparasitaires sur les parasites à l’intérieur des cellules hôtes, prenez une plaque de test contenant une culture adhérente de fibroblastes de prépuce humain dans plusieurs puits.

Distribuez des quantités égales de parasites Toxoplasma exprimant la luciférase – une enzyme productrice de luminescence – dans chaque puits. Incuber, permettant aux parasites d’envahir les cellules hôtes et de se développer à l’intérieur de la vacuole parasitophore.

Après l’incubation, aspirer le milieu en éliminant les parasites non ingérés. Complétez les puits avec différentes concentrations de cystéine et incubez.

Les molécules médicamenteuses pénètrent dans la cellule hôte pour atteindre les parasites. Une fois à l’intérieur, le médicament inhibe l’enzyme cystéine protéase du parasite, perturbant l’acquisi