Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:40 min • April 30th, 2023
Trypanosoma cruzi, un parasite intracellulaire obligatoire, envahit les cellules hôtes des mammifères sous forme de trypomastigote - flagellé et non prolifératif - et se différencie en amastigotes non flagellés, qui prolifèrent dans le cytoplasme par fission binaire.
Après la prolifération, les amastigotes se différencient à nouveau en trypomastigotes qui perturbent l’entrée des cellules hôtes dans la circulation, entraînant une infection systémique.
Pour évaluer le potentiel cytotoxique in vitro d’un médicament antiparasitaire testé contre Trypanosoma cruzi, il faut commencer par une culture de parasites transgéniques Trypanosoma cruzi — au stade de développement souhaité — exprimant de manière stable l’enzyme β-galactosidase.
Suspendez les parasites dans un milieu approprié. Transférer dans une plaque multipuits. Ajouter des concentrations appropriées du médicament antiparasitaire à l’essai. Couver.
Le médicament se diffuse passivement à travers les membranes du parasite et est métabolisé en intermédiaires toxiques. Ces métabolites pénètrent dans les noyaux et causent des dommages à l’ADN, inhibant la synthèse des protéines, y compris la β-galactosidase, ce qui a un impact négati
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