Dosage de l’agrégation PolyQ pour identifier l’effet neuroprotecteur d’un composé chez les vers

Dans certaines maladies neurodégénératives, la protéine associée à la maladie comprend un tractus polyglutamine expansé, polyQ – une chaîne de résidus de glutamine consécutifs – et est conformée de manière aberrante. La conformation altérée déstabilise l’homéostasie des protéines, provoquant l’accumulation de protéines et la formation d’agrégats toxiques, entraînant un dysfonctionnement neuronal et la mort.

Pour tester la capacité protectrice d’un composé d’essai à atténuer la protéotoxicité associée à l’agrégation polyQ, obtenir une suspension de larves transgéniques de Caenorhabditis elegans exprimant des protéines polyQ marquées par fluorescence dans les cellules musculaires de la paroi corporelle.

Prenez une assiette à plusieurs puits contenant des milieux complétés par de la nourriture bactérienne. Ajoutez la pâte d’essai dans un ensemble de puits. Transférez les larves dans la plaque multi-puits. Scellez la plaque pour éviter la déshydratation du milieu et la contamination microbienne. Incuber, permettant aux larves de devenir adultes.

Au cours du développement, à mesure que le nématode vieillit, les protéines polyQ s’accumulent progressivement dans les cellules musculaires e