Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 3:35 min • July 8th, 2025
Les cellules génèrent de faibles niveaux de radicaux libres au cours des processus métaboliques.
Dans des conditions pathologiques, une surproduction de radicaux libres se produit, provoquant un stress oxydatif. Ces radicaux libres attaquent les acides gras polyinsaturés dans les phospholipides de la membrane cellulaire dans un processus appelé peroxydation lipidique. Cela forme des produits d’oxydation toxiques, notamment des hydroperoxydes lipidiques et du malondialdéhyde (MDA), qui causent des dommages à la membrane et la mort cellulaire.
Pour détecter in vitro le stress oxydatif dans le sérum humain à l’aide du test TBARS (substance réactive à l’acide thiobarbiturique), commencez par un tube contenant du sérum humain traité avec un composé induisant l’oxydation. Le sérum traité comprend principalement des produits de peroxydation lipidique - MDA et hydroperoxydes lipidiques - ainsi que des phospholipides, des lipides et des protéines.
Ensuite, ajoutez du dodécylsulfate de sodium (SDS) et mélangez pour solubiliser les lipides et libérer le MDA. Le SDS dénature toutes les protéines contaminantes. Ajouter un tampon acide approprié, suivi d’acide thiobarbiturique acide (TBA). Incub
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