Test d’immunofluorescence pour évaluer l’effet des protéines cibles sur la croissance des neurites

0 vues • 3:52 min • July 8th, 2025

Les neurones en développement étendent les processus cytoplasmiques de leurs corps cellulaires par la croissance des neurites pour développer des dendrites et des axones, qui sont essentiels à la communication entre neurones.

Pour étudier l’effet d’une protéine cible sur la croissance des neurites, prenez une plaque multipuits avec une lamelle enrobée de poly-D-lysine à sa base. La surface de la lamelle présente une culture adhérente de neurones corticaux primaires dérivés du cerveau embryonnaire du rat.

Traitez les neurones avec un mélange contenant deux types de plasmides : un plasmide EGFP codant pour une protéine fluorescente verte améliorée et un second plasmide codant pour la protéine cible dans un réactif de transfection approprié.

Le réactif de transfection facilite l’entrée des plasmides dans les cellules.

Après la transfection, les deux plasmides sont exprimés, produisant des protéines fluorescentes vertes et des protéines cibles. L’expression de l’EGFP confère une fluorescence verte aux cellules co-transfectées.

Les protéines cibles ayant un potentiel de stimulation de l’excroissance des neurites initient la signalisation cellulaire, ce qui favorise la réorganisation du

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Neurones corticaux primaires