Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 6:43 min • July 8th, 2025
Les interactions protéine-protéine, IPP, sont essentielles à la régulation de la plupart des processus biologiques.
Pour détecter les IPP à l’aide de la biodétection à effet de champ, commencez par une puce de transistor à effet de champ en graphène. La puce comprend une surface en graphène fonctionnalisée au carboxyle comme canal semi-conducteur entre la source et les électrodes de drainage.
Incuber la puce avec une solution fraîche de carbodiimide et de N-hydroxysulfosuccinimide, sulfo-NHS, dans un tampon zwitterionique. Ce tampon crée un pH approprié, permettant au carbodiimide et au sulfo-NHS d’activer les groupes carboxyle fonctionnalisés de la puce, formant des esters réactifs aux amines.
Ajouter la solution protéique cible. Les amines primaires réagissent avec les esters réactifs aux amines, immobilisant les protéines sur la puce par la formation de liaisons amides. Ajouter une solution d’extinction contenant des amines pour bloquer les esters amines réactifs non liés, empêchant ainsi la liaison non spécifique.
Insérez la puce dans le lecteur électronique et calibrez-la avec un tampon. Le lecteur applique une tension constante entre les électrodes. Le flux de courant électri
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