Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 5:16 min • July 8th, 2025
Pour détecter les interactions antigène-anticorps à l’aide de la photométrie de masse, il faut d’abord incuber la concentration souhaitée d’antigènes et d’anticorps purifiés pendant la période de temps requise, facilitant ainsi la liaison antigène-anticorps. D’après la stœchiométrie de liaison à l’antigène, les régions paratopiques de ces anticorps peuvent avoir un nombre variable d’antigènes attachés.
Écoulez dans la solution contenant les anticorps libres ainsi que les complexes antigène-anticorps à travers une chambre d’écoulement pré-assemblée. Fixez la chambre sur la platine du microscope d’un photomètre de masse. Ensuite, dirigez le faisceau laser à travers la chambre d’écoulement pour une imagerie optimale.
En fonction du nombre d’antigènes attachés à chaque anticorps, la masse moléculaire des complexes change. Ces variations de masse font que les complexes diffusent la lumière différemment.
Les complexes de masse moléculaire plus élevée, où deux antigènes sont liés aux deux paratopes d’un seul anticorps, diffusent plus de lumière que les complexes contenant un seul antigène. De plus, les anticorps libres sont ceux qui diffusent le moins de lumière.
Un détecteur recueille la
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