Dosage par biocapteur conductimétrique basé sur la β-lactamase pour les interactions protéine-protéine

Pour commencer le test de biocapteur conductimétrique basé sur la β-lactamase, prenez une puce de transducteur avec des électrodes de travail, de compteur et de référence. L’électrode de travail est dotée d’un revêtement polymère conducteur, facilitant l’immobilisation de l’antigène cible. Les électrodes de référence et les contre-électrodes n’ont pas ce revêtement polymère.

Ajoutez une solution contenant l’antigène cible sur la puce. Couver. L’antigène est immobilisé à la surface de l’électrode de travail via des interactions non covalentes. Laver pour éliminer les antigènes non liés.

Ajoutez une solution de blocage. Les protéines de la solution se fixent aux sites non liés de l’électrode de travail et les bloquent.

Ajoutez une protéine chimérique bifonctionnelle à la puce pour détecter l’antigène immobilisé. La protéine chimérique comprend une enzyme β-lactamase, une protéine bactérienne responsable de la résistance aux antibiotiques. L’enzyme est fusionnée à un nanocorps, la région variable N-terminale des anticorps à domaine unique.

Lors de l’incubation, le nanocorps de la protéine se lie à l’antigène cible immobilisé. Laver pour éliminer les protéines chimériques non liées.

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