Sonde peptidique biotinylée pénétrant dans les cellules pour détecter les interactions protéine-protéine

Dans les cellules, les protéines se lient à leurs protéines en interaction via des séquences spécifiques de leur structure, modulant le fonctionnement des protéines intracellulaires.

Pour détecter les interactions protéiques intracellulaires, prenez une culture cellulaire adhérente. Aspirez le support.

Ajoutez un peptide biotinylé pénétrant dans les cellules, une solution BCPP et incuber.

Chaque BCPP contient une séquence peptidique qui aide à la liaison spécifique à la protéine intracellulaire ciblée. Le peptide a un peptide pénétrant dans les cellules, le CPP, à l’extrémité N-terminale du peptide et de la biotine à l’extrémité C-terminale pour une détection facile.

Pendant l’incubation, la région CPP chargée positivement facilite l’entrée des peptides liés à travers la membrane de la cellule, atteignant le cytoplasme. Le peptide se lie à son partenaire protéique intercellulaire intracellulaire, formant un complexe protéique cible-BCPP.

Ajoutez un tampon contenant des molécules détergentes qui rompent la membrane de la cellule et libèrent des complexes protéiques cibles BCPP et d’autres composants cellulaires.

Ajoutez une solution d’avidine liée aux billes d’agarose - une glycopro