Thermophorèse à l’échelle microscopique pour étudier les interactions protéine-lipide en solution

Pour étudier l’interaction des protéines avec les molécules lipidiques, il faut commencer par deux tubes capillaires. Ajoutez des protéines de test marquées à un colorant fluorescent dans les deux tubes et des molécules lipidiques non marquées à l’un d’entre eux. Placez ces capillaires dans un réseau et placez-les à l’intérieur d’un instrument de thermophorèse à l’échelle microscopique.

Irradiez le capillaire contenant des protéines avec une lumière infrarouge focalisée, créant une élévation de température dans le point focal qui se diffuse à travers la solution, générant un gradient de température dans une région étroite contenant des protéines marquées par fluorescence.

Le détecteur de fluorescence collecte le signal de fluorescence à partir du même endroit du capillaire, là où le laser est focalisé. Le processeur convertit le signal et génère un tracé de la fluorescence relative en fonction du temps.

Dans un gradient de température, les protéines marquées commencent à migrer de la région la plus chaude vers la région plus froide, présentant une thermophorèse - un phénomène de migration dépendant de la température.

En raison de la thermophorèse, l’intensité de la fluorescence dim