Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 4:19 min • July 8th, 2025
Un oligomère protéique est un complexe de plusieurs sous-unités protéiques qui sont liées entre elles pour former une unité fonctionnelle plus grande.
Pour déterminer la masse moléculaire des monomères protéiques et de leurs oligomères en solution par SEC-MALS, une combinaison de chromatographie d’exclusion stérique et de diffusion de la lumière multi-angle, commence par une colonne de chromatographie d’exclusion stérique, ou SEC.
La colonne contient des billes de gel sphériques poreuses en forme de passoire qui piègent des molécules de plus petite taille à l’intérieur. Équilibrez la colonne avec un tampon compatible avec l’état natif de la protéine.
Chargez un échantillon contenant des monomères et des oligomères de protéines en haut de la colonne.
Pendant l’écoulement, les oligomères traversent l’espace interparticulaire de la colonne, tandis que les monomères sont piégés dans les pores des billes. Cela fait que les oligomères protéiques de plus grande taille se déplacent plus rapidement que les monomères de plus petite taille.
Dirigez les oligomères à élution rapide, suivis des monomères à élution lente, vers le détecteur MALS.
Lorsqu’ils traversent le détecteur, une lumière las
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