Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 5:05 min • July 8th, 2025
La microscopie à feuillet de lumière sur treillis, LLSM, permet de visualiser les interactions récepteur-ligand à la surface cellulaire dans des cellules vivantes avec une résolution spatio-temporelle élevée.
Prenez une lamelle contenant des cellules exprimant des ligands transduits émettant une fluorescence rouge. Fixez la lamelle côté cellule vers le haut sur un porte-échantillon graissé. Fixez le support sur le piézo d’une platine de microscope pour permettre un positionnement et un balayage précis de l’échantillon pendant l’imagerie. Ajustez les paramètres du logiciel pour vous concentrer sur une seule cellule exprimant un ligand.
Pipetez la suspension cellulaire exprimant le récepteur sur la lamelle. Les récepteurs sont marqués avec des anticorps verts marqués au fluorophore. Imagez les paires de cellules en interaction.
Le laser d’excitation du microscope émet un faisceau laser circulaire à polarisation linéaire qui passe à travers des lentilles cylindriques pour créer une feuille de lumière. La feuille de lumière est projetée sur un modulateur qui élimine l’excès de diffraction et le transforme en un motif en réseau ultrafin.
La feuille lumineuse en réseau illumine une secti
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