Microscopie à fond noir pour visualiser la dynamique de diffusion de nanobâtonnets sur la membrane cellulaire

Pour étudier la dynamique de diffusion des nanotiges d’or sur une membrane de cellules vivantes à l’aide de la microscopie à fond noir, la DFM, combinée au suivi de particules uniques, commence par une lamelle stérilisée dans une boîte de culture contenant un milieu approprié. Ajoutez la suspension cellulaire sur la lamelle. Le milieu facilite la croissance cellulaire.

Incuber avec des nanotiges d’or chargées positivement qui s’adsorbent sur la membrane cellulaire chargée négativement via des interactions électrostatiques. Pipetez le support du plat jusqu’au sillon d’une lame de verre. Placez la lamelle côté cellulaire vers le bas sur la rainure et scellez.

Placez la lame sur la platine du microscope à fond noir. Le microscope éclaire l’échantillon avec une lumière oblique à angle élevé passant à travers un condenseur à fond noir spécialisé.

Lors de l’illumination des nanobâtonnets, les électrons libres à la surface des nanobâtonnets oscillent à une fréquence résonnant avec la lumière incidente. Les électrons oscillants diffusent la lumière à une longueur d’onde spécifique capturée par la lentille de l’objectif, ce qui permet de visualiser les nanotiges.

De même, la membrane cellul