Encyclopédie des expériences JoVE
Techniques biologiques
0 vues • 6:47 min • July 8th, 2025
Commencez par incuber des molécules de colorant rapporteur Raman avec des nanoparticules d’or pour que les rapporteurs se lient aux nanoparticules.
Ajoutez du polyéthylène glycol, des anticorps conjugués au PEG spécifiques à l’antigène cible. Les anticorps se fixent de manière covalente aux nanoparticules par liaison au disulfure d’or. Ajoutez des PEG conjugués au thiol pour bloquer les sites de nanoparticules restants et empêcher l’agrégation de nanoparticules, formant ainsi des sondes de nanoparticules.
Enduisez les puits de la plaque d’immunodosage avec l’antigène cible. Bloquez les sites de plaque restants avec une solution contenant des protéines. Ajouter les sondes à nanoparticules. Effectuer une dilution en série de la sonde à travers les puits. Incuber pour que les anticorps des sondes se lient aux antigènes, formant des complexes.
Utilisez un microscope Raman pour déterminer la réponse optique de la sonde. Le laser monochromatique incident excite les électrons de surface des nanoparticules d’or et provoque leur oscillation, créant un champ électromagnétique local élevé à la surface de la sonde.
Le faisceau incident et les rapporteurs Raman interagissent, provoquant une lum
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