Génération in vitro de cellules dendritiques plasmacytoïdes à partir de progéniteurs lymphoïdes communs
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:39 min • July 8th, 2025
Les cellules dendritiques plasmacytoïdes, ou pDC, sont des cellules immunitaires qui réagissent à l’infection en produisant l’interféron cytokine de type I.
Pour générer des pDC in vitro, prenez une suspension de cellules progénitrices lymphoïdes communes, ou CLP, isolées de la moelle osseuse de souris. Les CLP peuvent se différencier en lymphocytes et en cellules dendritiques.
Ajoutez la suspension cellulaire sur une couche de cellules nourricières – des cellules stromales adhérentes – irradiées par des rayons gamma pour inhiber la prolifération. Les cellules nourricières fournissent les cytokines et le contact cellule-cellule nécessaires à la différenciation des CLP.
Ajoutez une concentration adéquate de ligand tyrosine kinase 3 de type Fms, ou FL - une cytokine bivalente qui favorise le développement de la pDC - et incuber.
Les CLP migrent entre les cellules nourricières et prolifèrent pour former des groupes de cellules, appelés zones de galets.
Le FL dans le milieu se lie au récepteur Flt3 - un récepteur tyrosine kinase - sur les CLP. La liaison induit la dimérisation des récepteurs et l’autophosphorylation des résidus de tyrosine sur le domaine cytoplasmique.
Les protéines ad
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