Isolement de cellules T basé sur la flottation à l’aide d’un tri cellulaire activé par flottabilité

Pour isoler les lymphocytes T – des globules blancs essentiels au système immunitaire – à l’aide du tri cellulaire activé par flottabilité, BACS, prenez une suspension de cellules mononucléées du sang périphérique, PBMC. Les PBMC contiennent des lymphocytes T cibles et des cellules non cibles comme les lymphocytes B, les monocytes, les cellules tueuses naturelles et les cellules dendritiques.

Ajoutez un tampon contenant une quantité adéquate d’anticorps anti-CD3 biotinylés et incubez pendant la durée requise. L’anticorps se lie au complexe CD3 – un complexe protéique multimérique à la surface de la cellule – une caractéristique déterminante des lymphocytes T.

Ajoutez des microbulles fonctionnalisées – de petites particules sphériques enrobées de streptavidine – pour une sélection positive des lymphocytes T liés aux anticorps. Le cœur de chaque microbulle est une sphère creuse, ce qui en fait des particules de faible densité capables de flotter dans une solution aqueuse.

Incuber le mélange sous agitation, en laissant les microbulles et l’échantillon se mélanger complètement. Pendant l’incubation, la streptavidine sur la microbulle se lie à la biotine sur l’anticorps lié aux lymphocy