Culture de lymphocytes T activés à partir de cellules mononucléées du sang périphérique humain

De multiples interactions récepteurs-ligands à la surface cellulaire entre les lymphocytes T naïfs et les cellules présentatrices d’antigènes, les APC, provoquent l’activation et la prolifération des lymphocytes T.

Les deux événements principaux de ce processus impliquent la reconnaissance de l’antigène exprimé par l’APC par le complexe récepteur CD3-T-T, suivie de l’interaction entre le ligand B7 exprimé par APC et le récepteur T CD28.

Pour étudier l’activation et la prolifération des lymphocytes T in vitro, il faut prendre des cellules mononucléées du sang périphérique humain, PBMC, en suspension dans un milieu de culture approprié. Ajoutez des billes magnétiques recouvertes d’anticorps anti-CD3 et anti-CD28, et divisez les cellules en deux tubes coniques.

Ajoutez la cytokine interleukine-2, IL-2, dans le premier tube et l’interleukine-15, IL-15, dans l’autre. Transférez les cellules dans une plaque multi-puits. Couver.

Les anticorps anti-CD3 et anti-CD28 des billes se lient au complexe récepteur des lymphocytes T CD3 et au récepteur CD28 exprimés sur les lymphocytes T, respectivement, provoquant l’activation et la prolifération des lymphocytes T.

Avec l’IL-2, la cytokine se lie