Système de culture thymique tridimensionnelle pour générer des émigrants thymiques dérivés d’iPSC

Pour générer des émigrants thymiques dérivés d’iPSC, les iTE à partir de lymphocytes T immatures dans un système de culture d’organes thymiques 3D, prennent de la désoxyguanosine, des lobes thymiques fœtaux de souris traités par dYUO dans un milieu approprié.

dGUO pénètre dans l’environnement thymique et détruit les lymphocytes thymiques endogènes, empêchant ainsi leur interférence avec les lymphocytes T immatures dérivés d’iPSC pendant la co-culture.

Faites une incision profonde au centre de chaque lobe thymique. Transférez les lobes dans une boîte de culture fraîche contenant un milieu complété par les facteurs de croissance, le facteur de cellules souches, le ligand FLT3 et l’interleukine-7.

Pipeter le milieu contenant le lobe thymique dans les puits d’une plaque de culture 3D. Ajoutez des lymphocytes T immatures dérivés d’iPSC. Couver. Les lymphocytes T migrent dans les lobes thymiques par l’incision.

Dans l’environnement thymique, les facteurs de croissance FLT3 ligand et IL-7 se lient à leurs récepteurs respectifs sur les cellules T immatures, conduisant à l’activation de facteurs de transcription et à l’expression de gènes spécifiques.

Par conséquent, les lymphocytes T immat