Reconnaissance de marqueurs CD de cellules tueuses induites par des cytokines humaines par cytométrie en flux

Les cellules CIK sont des populations de cellules immunitaires hétérogènes générées ex vivo à partir de cultures de cellules mononucléées du sang périphérique (PBMC) stimulées par des cytokines spécifiques et des anticorps monoclonaux. Les cellules CIK comprennent des populations cellulaires, notamment les cellules NK-T CD3+CD56+, les cellules T CD3+CD56- et les cellules NK CD3-CD56+.

Pour déterminer la proportion de cellules CIK, commencez par utiliser des tubes contenant une suspension de cellules CIK dérivée de PBMC. Ajouter des anticorps anti-CD3 et anti-CD56 conjugués à différents fluorophores et leur mélange dans des tubes désignés. Ajouter des anticorps de contrôle des isotypes conjugués à des fluorophores similaires en tant qu’anticorps spécifiques dans d’autres tubes.

Les anticorps anti-CD3 et anti-CD56 marqués par fluorescence reconnaissent et se lient aux CD3 et CD56 exprimés sur les populations de cellules CIK, respectivement. Les anticorps de contrôle des isotypes n’ont pas de spécificité d’antigène cible, ce qui facilite les mesures non spécifiques du signal de fond.

Pipetez les cellules dans des tubes à fond rond avec des capuchons de crépine de cellules, qui aident