Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:58 min • July 8th, 2025
À la suite d’une lésion vasculaire, les plaquettes sont recrutées et activées sur le site de la lésion pour former un bouchon plaquettaire et initier la réparation des tissus.
Pour purifier les plaquettes du sang total murin et les activer in vitro, prenez un milieu à gradient de densité approprié. Superposez soigneusement l’échantillon de sang sur le support. Centrifugeuse pour séparer les plaquettes du plasma et les couches de globules rouges et blancs.
Transférez les plaquettes dans deux nouveaux tubes contenant un tampon de coloration approprié. Ajoutez le tétrapeptide synthétique GPRP contenant la séquence d’acides aminés glycine-proline-arginine-proline dans un tube, suivi de thrombine.
La thrombine clive des domaines extracellulaires spécifiques des récepteurs de la thrombine à la surface des plaquettes, initiant une cascade de signalisation en aval et activant les plaquettes. Les granules des plaquettes activées libèrent la protéine CD62P, qui se déplace rapidement à la surface de la membrane.
Le tétrapeptide GPRP bloque le fibrinogène – une glycoprotéine qui se lie à l’intégrine CD41/CD61 couvrant la membrane sur les plaquettes activées pour initier l’agrégation plaquettai
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