Isolement sélectif de lymphocytes T CD4⁺ Vδ1⁺ γδ à partir de cellules mononucléées de sang périphérique humain

Les lymphocytes T γδ expriment des récepteurs de lymphocytes T, les TCR, comprenant des chaînes gamma et delta avec des domaines variables et constants.

Les lymphocytes T CD4+ Vδ1+ — une sous-population de lymphocytes T γδ — co-expriment la chaîne variable Vδ1 et le corécepteur CD4. Ces cellules migrent dans les tissus enflammés et se transdifférencient en lymphocytes T CD4+ ou CD8+ αβ fonctionnellement matures, médiant ainsi une réponse immunitaire.

Pour isoler les lymphocytes T CD4+ Vδ1+ des cellules mononucléées du sang périphérique humain, les PBMC, les cellules sont remises en suspension dans un tampon. Utilisez un réactif bloquant Fc pour bloquer les récepteurs Fc à la surface cellulaire et empêcher la liaison d’anticorps non spécifiques.

Ajoutez des anticorps anti-Vδ1 conjugués au fluorophore FITC, qui se lient aux antigènes Vδ1 des lymphocytes T γδ. Incuber avec des microbilles magnétiques couplées à des anticorps anti-FITC, qui se fixent au colorant FITC sur les anticorps liés aux cellules T Vδ1.

Faites passer le mélange à travers une colonne magnétique pour attirer les lymphocytes T Vδ1+ liés aux billes ; les lymphocytes T Vδ1- restent libres et sont ensuite évacués. Rinc