Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:49 min • July 8th, 2025
Les pièges extracellulaires à macrophages, les MET, sont des structures en forme de toile libérées par les macrophages pour piéger et éliminer les agents pathogènes.
Les MET comprennent des fibres de chromatine extracellulaires associées à la métalloprotéinase matricielle-9, à la MMP-9 et à l’histone citrullinée H3, H3Cit - une protéine d’histones modifiée dans laquelle l’arginine est convertie en citrulline.
Pour caractériser les MET dans des coupes de tissu pulmonaire murin fixées au formol et incluses dans de la paraffine, il faut d’abord sécher les lames. Immerger dans le xylène pour déparaffiniser les sections. Utilisez de l’éthanol aqueux pour réhydrater les sections.
Chauffez les sections pour briser les réticulations protéiques induites par le formol, exposant les antigènes cibles pour la liaison ultérieure des anticorps.
Ajouter une solution contenant des protéines pour bloquer les sites de liaison non spécifiques. Incuber avec un cocktail d’anticorps primaires anti-MMP-9, anti-H3Cit et anti-F4/80.
L’anticorps anti-F4/80 se lie à la glycoprotéine F4/80 de surface des cellules de macrophages. Les anticorps anti-MMP-9 et anti-H3Cit se lient respectivement au MMP-9 et au H3Ci
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