Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:50 min • July 8th, 2025
Les microparticules cellulaires sont des vésicules membranaires de taille submicronique qui renferment des biomolécules libérées par la membrane plasmique des cellules eucaryotes subissant l’apoptose.
Pour générer des microparticules dérivées des lymphocytes T, les LMP in vitro, prenez une fiole de culture contenant une culture de lymphocytes T. Ajoutez de l’actinomycine-D, un antibiotique. Incuber pour une durée appropriée.
L’actinomycine D pénètre dans les lymphocytes et se déplace vers le noyau. Il s’intercale entre des paires de bases d’ADN spécifiques, inhibant la transcription. Cela conduit à l’arrêt du cycle cellulaire et active la voie apoptotique.
Au début de l’apoptose, la caspase-3 activée clive et active la kinase rho-associée, ROCK1. ROCK1, à son tour, phosphoryle ses protéines cibles en aval, provoquant la contraction de l’actomyosine, entraînant une bulle membranaire et la libération ultérieure de LMP contenant les composants cytosoliques et nucléaires dans le milieu.
Les cellules finissent par subir une apoptose.
Après l’incubation, transférez le milieu de culture dans un tube frais. Centrifugeuse pour granuler les lymphocytes T. Transférez le surnageant dans un tub
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