Technique d’isolement des mastocytes primaires d’une cavité péritonéale murine

Les mastocytes – des globules blancs contenant des granules cytoplasmiques remplis de médiateurs inflammatoires – jouent un rôle majeur dans les réponses immunitaires innées et adaptatives.

Pour isoler les mastocytes de type tissu conjonctif de la cavité péritonéale – un espace rempli de liquide abritant des organes abdominaux – prenez une souris euthanasiée fixée en position couchée. Faites une incision longitudinale jusqu’au sternum, en exposant la paroi abdominale.

La cavité péritonéale se trouve sous la paroi abdominale, contenant un liquide qui abrite plusieurs cellules immunitaires, notamment des macrophages, des lymphocytes, des leucocytes polymorphonucléaires et des mastocytes.

Pour isoler les cellules par lavage péritonéal – en aspirant le contenu intrapéritonéal – injectez un milieu de croissance glacé dans la cavité péritonéale sans perforer les organes, évitant ainsi les fuites sanguines. Le milieu froid aide à maintenir la viabilité cellulaire.

Secouez soigneusement la souris pendant une durée adéquate, en mélangeant les cellules immunitaires avec le milieu. Insérez une seringue vide dans la cavité. Aspirez lentement le milieu - en récupérant la majeure partie du liqui