Procédé d’induction d’une inflammation de la surface oculaire dans un modèle murin

Le système de la surface oculaire comprend la cornée, la conjonctive et un réseau de glandes associé. Un film lacrymal protège la surface oculaire.

L’évaporation de la couche aqueuse du film lacrymal est inhibée par une couche lipidique sécrétée par les glandes de Meibomius. L’inflammation de la surface oculaire obstrue la sécrétion de lipides, entraînant une sécheresse oculaire

Pour induire une inflammation de la surface oculaire dans un modèle murin, prenez une souris et injectez une solution immunogène par voie intrapéritonéale. L’immunogène active les lymphocytes T auxiliaires, ou lymphocytes Th, pour provoquer une réponse immunitaire. Les cellules activées se propagent aux yeux par circulation systémique.

Après l’incubation, effectuez un test de la surface oculaire en appliquant l’immunogène sur l’œil, générant une réponse immunitaire exagérée.

Les cellules présentatrices d’antigène présentent l’immunogène aux cellules Th activées. La restimulation des lymphocytes Th provoque la libération de cytokines et de chimioattractants, entraînant une inflammation de la surface oculaire.

Les chimioattractants provoquent un afflux de neutrophiles. La liaison aux cytokines active une cascade de signalisation à l’intérieur des neutrophiles, générant des espèces réactives de l’oxygène ou ROS. Les ROS générés provoquent la libération de protéines antimicrobiennes à partir des granules cytoplasmiques et la décondensation de la chromatine.

Les fibres de chromatine décondensées et les protéines granulaires forment une structure semblable à une toile extracellulaire appelée piège extracellulaire à neutrophiles agrégés ou aggNET. La production excessive d’aggNET obstrue les ouvertures des glandes de Meibomius, empêchant ainsi la sécrétion de lipides.

Le modèle murin de l’inflammation de la surface oculaire est prêt pour l’analyse en aval.

Pour effectuer une injection intrapéritonéale de la solution immunogène, tenez doucement la souris femelle C57 Black 6 non anesthésiée âgée de 7 à 9 semaines par la queue tout en saisissant la grille de la cage. Ensuite, tenez fermement la peau du dos et la région du cou entre le pouce et l’index et fixez la queue et les membres inférieurs entre l’annulaire et l’auriculaire contre la paume. En gardant la souris fixe avec la tête vers le bas, injectez 100 microlitres de la solution immunogène préparée dans le quadrant droit ou gauche de la cavité abdominale inférieure.

Pour effectuer un test de provocation de la surface oculaire après la vaccination, appliquez 5 microlitres d’ovalbumine, ou d’ovule, ou de solution saline par œil d’une souris anesthésiée, et attendez 5 minutes pour que la goutte soit absorbée par l’œil. Ensuite, collectez les exsudats oculaires en appliquant 50 microlitres de solution saline stérile sur l’œil immédiatement après le défi.