Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:27 min • July 8th, 2025
L’ostéoclastogenèse est le processus par lequel les précurseurs des ostéoclastes se différencient et fusionnent pour former des ostéoclastes multinucléés.
Pour étudier l’effet de l’anticorps anti-c-fms sur l’ostéoclastogenèse in vitro, prenez une plaque de culture contenant une suspension de cellules de moelle osseuse de souris. Ajouter le facteur de stimulation des colonies de macrophages, le M-CSF.
En culture, le M-CSF se lie à son récepteur spécifique, le c-fms, sur les cellules précurseurs myéloïdes, activant les voies de signalisation et provoquant la différenciation en macrophages de la moelle osseuse, les BMM, qui représentent les précurseurs des ostéoclastes et adhèrent à la plaque.
Retirez les cellules non adhérentes. Récoltez les BMM et semez-les dans des puits à plaques multi-puits. Supplément de M-CSF et d’activateur du récepteur du ligand du facteur nucléaire kappa-B, RANKL.
Ajoutez des concentrations croissantes d’anticorps anti-c-fms dans les puits.
Dans le puits témoin, le M-CSF se lie aux récepteurs c-fms et active les voies de signalisation, stimulant l’expression du récepteur RANK et favorisant la survie et la prolifération des BMM. RANKL se lie aux récepteurs RA
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