Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:50 min • July 8th, 2025
Le sulfate de dextran sodique, ou DSS, induit une colite - une maladie inflammatoire de l’intestin - où la perturbation de la barrière épithéliale intestinale entraîne une inflammation.
Pour évaluer les lésions tissulaires, prenez du tissu du côlon fixe isolé à partir d’un modèle murin de colite induite par le DSS. Plongez le tissu dans un milieu d’enrobage pour faciliter la sectionnement et congelez-le rapidement.
À l’aide d’un cryo-microtome, prélevez une fine section de tissu et prélevez-la sur une lame de verre.
Trempez la lame dans une solution contenant un colorant d’hématoxyline oxydé lié à un mordant - un cation métallique - conférant une charge positive au colorant. Le complexe colorant-mordant se lie à l’ADN chargé négativement, colorant le noyau en violet rougeâtre.
Immergez le tissu dans une solution acido-alcoolique différenciante, en éliminant le colorant non spécifiquement lié du cytoplasme et de la matrice extracellulaire. Rincez le tissu avec un agent bleuissant - un milieu alcalin - conférant une couleur bleue aux noyaux, améliorant ainsi le contraste.
Immergez la lame dans des concentrations croissantes d’alcool pour déshydrater les tissus, améliorant ainsi la pé
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