Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:09 min • July 8th, 2025
Pour étudier les interactions entre l’hôte et le microbiote intestinal ex vivo, commencez par un tissu murin du côlon exempt de bactéries spécifiques colonisant l’intestin. Rincer le tissu avec un milieu pour enlever les matières fécales et transférer dans une plaque multipuits contenant un milieu approprié.
En même temps, assemblez le dispositif de culture d’organes intestinaux ex vivo à plusieurs puits.
Chaque puits de l’appareil comprend deux ports d’entrée et de sortie appariés - le premier se connectant à la lumière du côlon et le second fournissant une alimentation continue de fluide aux puits pour maintenir la viabilité des tissus.
Transférez le tissu dans l’appareil. Connectez les extrémités proximale et distale du côlon à la première paire de ports d’entrée et de sortie. Démarrez le flux de stimulants luminaux dans la lumière du côlon et le flux moyen dans le puits.
Le stimulant contient des bactéries colonisatrices de l’intestin qui sécrètent des enzymes dégradant la couche de mucus, leur permettant de se fixer aux cellules épithéliales sous-jacentes. Cela active une cascade de signalisation qui déclenche les cellules dendritiques résidentes pour étendre leurs dendrites e
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