Un essai in vitro pour étudier l’interaction entre les neutrophiles et le biofilm

Un biofilm est une communauté de bactéries adhérant en surface intégrées dans une matrice de substances polymères extracellulaires, EPS, d’origine microbienne.

Pour étudier in vitro les interactions entre les cellules immunitaires et le biofilm, prenez une lame avec un canal contenant un biofilm de Staphylococcus aureus – un agent pathogène opportuniste. Les bactéries modifiées expriment une protéine fluorescente pour la détection microscopique. Le canal se connecte à des réservoirs remplis de milieux pour fournir des nutriments aux bactéries.

Ajouter une suspension de neutrophiles marqués avec un colorant fluorescent de suivi des cellules. Le milieu contient également un homodimère d’éthidium, qui colore l’ADN des cellules mortes. Incuber dans des conditions physiologiques.

Les récepteurs de reconnaissance de formes sur les neutrophiles se lient aux motifs moléculaires associés aux agents pathogènes sur les bactéries. La liaison induit les neutrophiles à phagocyter les bactéries et à produire des espèces de l’oxygène réactives extracellulaires ou ROS, tuant ainsi les bactéries.

Pour échapper à la réponse immunitaire, les bactéries libèrent des enzymes détoxifiantes qui diminuent l