Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:12 min • July 8th, 2025
Pour étudier l’impact des antimicrobiens sur les agrégats bactériens, prenez une culture de Pseudomonas aeruginosa dans un milieu de croissance qui favorise la formation d’agrégats, simulant la croissance pendant l’infection.
Les bactéries modifiées expriment une protéine fluorescente pour la détection globale au microscope à fluorescence. Image en trois dimensions pour calculer le volume des agrégats, ou la biomasse bactérienne, et visualiser l’augmentation de la biomasse au fil du temps, indiquant la croissance bactérienne.
Ajoutez de la colistine – un peptide cationique antimicrobien – à une concentration sublétale qui tue les bactéries sensibles tout en sélectionnant celles qui résistent aux antibiotiques.
La colistine se lie aux lipopolysaccharides chargés négativement, ou LPS, sur la membrane externe bactérienne, déplaçant les ponts cationiques qui stabilisent la monocouche LPS, endommageant ainsi l’intégrité de la membrane.
La colistine pénètre dans le périplasme et se lie au LPS sur la membrane cellulaire, perturbant la membrane et entraînant une lyse cellulaire. En tant que contre-mécanisme, des mutations génétiques spécifiques dans un sous-ensemble de bactéries neutralise
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