Un test pour étudier la régulation de la phagocytose des macrophages par les cellules souches mésenchymateuses

Prenez une plaque multipuits avec des cellules souches mésenchymateuses, ou CSM, dans des puits sélectionnés.

Introduire des macrophages et incuber, facilitant ainsi l’interaction MSC-macrophage dans les puits de co-culture.

Ajoutez du zymosan – un composant de la paroi cellulaire de la levure – conjugué à un fluorophore sensible au pH dans tous les puits.

Les récepteurs piégeurs de macrophages se lient au zymosan, déclenchant son engloutissement à l’intérieur d’un phagosome, qui fusionne avec un lysosome pour former un phagolysosome.

Un pH acide à l’intérieur du phagolysosome provoque l’émission de fluorescence par le fluorophore.

Dans les puits de co-culture, les CSM projettent des nanotubes à effet tunnel, ou TNT, des extensions cytoplasmiques qui font le pont avec les macrophages. Les mitochondries MSC traversent le TNT pour pénétrer dans les macrophages, augmentant ainsi le nombre total de mitochondries fonctionnelles.

Un nombre élevé de mitochondries augmente la production d’adénosine triphosphate ou ATP, ce qui alimente les besoins énergétiques pour une augmentation de la phagocytose.

Enregistrez l’intensité de fluorescence au fil du temps à partir des zymosans conjugués aux