Quantification de la charge d’Helicobacter pylori dans l’estomac d’une souris infectée

Pour quantifier la colonisation par Helicobacter pylori dans l’estomac d’une souris infectée, il faut commencer par le tissu gastrique aplati contenant les régions du corps et de l’antre, en suspension dans un milieu nutritif pour favoriser la viabilité bactérienne.

Homogénéiser pour décomposer le tissu gastrique avec la couche de mucus, libérant Helicobacter pylori du tissu dans le milieu. Effectuer des dilutions en série de l’homogénat gastrique résultant à l’aide d’un fluide.

Obtenez des plaques d’agar-gélose au sang de cheval séché, HBA, divisées en plusieurs segments. Les plaques HBA sont complétées par un mélange d’antibiotiques. Transférez chaque dilution d’homogénat sur des segments séparés de la plaque et étalez-la uniformément.

Après le séchage, positionnez les plaques en position inversée à l’intérieur d’un bocal de culture anaérobie humidifié avec des mélanges de gaz spécialisés. Couver.

L’environnement microaérophile fourni par le bocal de culture anaérobie en conjonction avec les nutriments HBA facilite la croissance et la formation de colonies d’Helicobacter pylori. Les antibiotiques contenus dans l’HBA inhibent la croissance des espèces bactériennes du microbiote ga