Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:29 min • July 8th, 2025
Commencez par ajouter des agents chimioattractants, tels qu’une chimiokine, dans une plaque multipuits.
Placez une chambre perméable transwell d’une taille de pores appropriée dans le puits. Ajoutez une suspension de cellules tueuses naturelles, ou NK, dans la chambre supérieure et incuberez.
Quelques molécules de chimiokines diffusent à travers la membrane et se lient aux récepteurs des cellules NK. Cela déclenche des voies de signalisation qui favorisent les changements cytosquelettiques, entraînant un mouvement cellulaire directionnel vers la concentration plus élevée de chimioattractant dans la chambre inférieure.
Après l’incubation, transférez un volume fixe de cellules migrées de la chambre inférieure vers un tube de tri cellulaire activé par fluorescence ou un tube FACS. Ajoutez un nombre prédéterminé de billes de comptage fluorescentes et effectuez un comptage de cellules basé sur FACS.
À l’aide de la formule suivante, déterminez le nombre absolu de cellules NK migrées dans l’échantillon.
Le graphique à points indique le nombre de billes et de cellules de comptage séparées en régions distinctes, en fonction de leurs propriétés de fluorescence et de diffusion.
Pour mesurer l
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