Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
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Exposer une souris à des gouttelettes d’aérosol contenant Mycobacterium tuberculosis.
Les bactéries atteignent la lumière des alvéoles – les minuscules sacs d’air à l’intérieur des poumons – contenant des macrophages.
Les récepteurs de reconnaissance des motifs des macrophages se lient aux motifs moléculaires associés aux agents pathogènes sur les bactéries, déclenchant leur engloutissement dans un phagosome.
Les bactéries englouties sécrètent des protéines spécialisées, qui rompent la membrane du phagosome. Les bactéries s’échappent dans le cytoplasme et se reproduisent.
Après l’infection, anesthésie la souris. Administrer par voie intrapéritonéale un substrat rapporteur de l’enzyme bactérienne β-lactamase pour l’imagerie par fluorescence de l’enzyme rapporteure ou REF.
Le substrat atteint les alvéoles pulmonaires par circulation et pénètre dans les cellules infectées.
Il pénètre dans la membrane externe bactérienne pour atteindre l’espace périplasmique contenant la β-lactamase.
Le substrat contient un anneau β-lactame reliant un fluorochrome et un extincteur. En raison de la proximité, la fluorescence du fluorochrome est absorbée par le quencher.
La β-lactamase hydrolyse le cycle
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