Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
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Commencez par une culture de cellules endothéliales.
Remplacez le support par un support anaérobie. Incuber dans une chambre anaérobie pour l’équilibrage de la température.
Ajoutez Porphyromonas gingivalis, une bactérie anaérobie pathogène, et incubez brièvement.
Les bactéries possèdent des projections protéiques, appelées fimbriae, qui se lient à des molécules d’adhésion spécifiques sur les cellules endothéliales, facilitant ainsi l’adhésion bactérienne.
Cette liaison déclenche des cascades de signalisation intracellulaire, entraînant un réarrangement du cytosquelette d’actine et une internalisation bactérienne dans les phagosomes.
Après l’incubation, retirer le milieu. Laver avec un tampon anaérobie pour éliminer les bactéries extracellulaires non adhérentes.
Ajoutez un détergent doux pour perméabiliser les membranes des cellules hôtes et induire la lyse cellulaire, libérant les bactéries internalisées et attachées à la surface sans causer de dommages.
Diluez les bactéries contenant du lysat avec un milieu et préparez des dilutions en série.
Placez ces dilutions sur des plaques de gélose au sang. Incuber dans des conditions anaérobies pour permettre à Porphyromonas gingivalis de
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