Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:25 min • July 8th, 2025
Dans le microenvironnement du cancer, les neutrophiles activés libèrent des pièges extracellulaires de neutrophiles, ou TNE, composés de fibres d’ADN extracellulaires, d’histones et de protéines granulaires, qui jouent un rôle crucial dans la progression du cancer.
Pour étudier in vitro l’adhésion des cellules cancéreuses aux NET, ajoutez une suspension de TNE à des puits de plaques multipuits. Incuber pour la formation de monocouches NET.
Après l’incubation, retirer les TNE non adhérentes.
Ajoutez une solution protéique pour bloquer les sites de liaison libres dans les puits.
Pipeter les cellules cancéreuses marquées par fluorescence sur des monocouches de TNET.
Des récepteurs de surface spécifiques sur les cellules cancéreuses interagissent avec les TNE, facilitant l’adhésion cellulaire.
Après l’incubation, jeter le milieu du puits témoin négatif.
Ajoutez de la désoxyribonucléase pour dégrader les TNE, en détachant les cellules.
Retirer les solutions des puits de contrôle négatif et d’essai. Utilisez un tampon pour éliminer les cellules non adhérentes.
Fixez les cellules cancéreuses adhérentes aux TNE avec du formaldéhyde.
À l’aide d’un microscope à fluorescence, visualisez les c
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