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Immunologie
0 vues • 3:43 min • July 8th, 2025
Prenez un tube contenant du sang humain fraîchement prélevé et ajoutez-y un tampon de lyse.
Le détergent contenu dans le tampon perméabilise la membrane cellulaire, lyse les cellules et libère des acides nucléiques intracellulaires, ou NA, et des nucléases.
Les agents chaotropiques présents dans le tampon dénaturent les nucléases, empêchant la dégradation de l’NA.
Ajoutez des particules de verre magnétique ou MGP (particules magnétiques recouvertes de silice) et mélangez soigneusement.
Le faible pH du tampon protone la silice, ce qui donne une charge positive à la surface des MGP.
Les NA chargés négativement se lient électrostatiquement à la surface chargée, formant un complexe NA-MGP.
Sous un champ magnétique, les complexes NA-MGP s’accumulent sur le côté du tube.
Jetez le surnageant contenant des débris cellulaires et des protéines.
Effectuez plusieurs étapes de lavage en remettant en suspension les complexes NA-MGP dans un tampon de lavage, en appliquant un champ magnétique pour collecter les complexes et en éliminant le surnageant avec les contaminants restants.
Remettre en suspension les complexes dans un tampon d’élution. Le pH élevé perturbe l’interaction NA-MGP, libérant le
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