Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 7:53 min • July 8th, 2025
Préparez une lame de chambre avec une bicouche lipidique supportée, ou SLB, composée de phospholipides et de phospholipides biotinylés.
Ajoutez des protéines bloquantes pour éviter les interactions non spécifiques.
Introduire la streptavidine, qui se lie aux phospholipides biotinylés.
Ajoutez des anticorps anti-CD16 biotinylés marqués par fluorescence, qui se lient à la streptavidine immobilisée.
Pipette D-biotine pour empêcher la liaison non spécifique de la streptavidine aux cellules.
Introduisez des cellules tueuses naturelles, ou NK. Les récepteurs CD16 de ces cellules se lient spécifiquement aux anticorps anti-CD16 liés à la SLB, formant une synapse immunologique.
Cette liaison déclenche le réarrangement de l’actine et la polarisation des microtubules, formant finalement des micrograppes au centre de la synapse contenant des anticorps anti-CD16 liés à la SLB et des récepteurs CD16.
Les granules lytiques contenant de la perforine se polarisent et pénètrent à travers les filaments d’actine au niveau de la synapse.
Fixez les cellules. Perméabiliser les membranes et SLB.
Ajoutez des anticorps anti-phalloïdine et anti-perforine marqués par fluorescence, qui se lient respectivement
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