Préparation à base d’agarose de tranches de poumon humain coupées avec précision

Commençons par un poumon humain réséqué.

Insérez un tube de silicone dans la bronche principale du poumon. Fixez le tube, en fournissant une voie pour l’introduction de l’agarose dans le tissu dans les étapes suivantes.

Serrez les autres bronches et vaisseaux pour éviter les fuites d’agarose pendant le remplissage.

Introduisez dans les poumons de l’agarose préchauffée à faible teneur en gélification mélangée à du milieu jusqu’à ce qu’elle soit complètement gonflée.

Placez le poumon sur de la glace pour la polymérisation de l’agarose, formant une matrice de gel solide qui assure la stabilité du tissu et maintient l’architecture pulmonaire pendant les procédures de section.

Après polymérisation, coupez le tissu pulmonaire en plaques uniformes. Extraire des carottes de tissus cylindriques des plaques de tissus.

À l’aide d’une trancheuse à tissus remplie d’un tampon réfrigéré, coupez le noyau de tissu pour obtenir des tranches de poumon coupées avec précision.

Transférez les tranches dans une plaque de culture contenant des milieux réfrigérés. Incuber pour stabiliser les tissus.

Enfin, transférez les tranches dans une plaque multipuits contenant un support. Les tranches de poumon prépa