Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:10 min • July 8th, 2025
Prenez une plaque multi-puits contenant des tranches de poumon humaines coupées avec précision, qui maintiennent la microarchitecture pulmonaire native.
Retirez le support. Ajoutez des concentrations croissantes d’agent d’essai dans les puits et incuberez.
En fonction de son potentiel cytotoxique, l’agent testé perturbe les membranes cellulaires, induisant la mort cellulaire et réduisant les cellules viables à l’intérieur des tranches.
Après l’incubation, retirer le milieu. Immergez les tranches dans un milieu contenant du sel de tétrazolium soluble dans l’eau, ou WST-1, et un réactif de couplage d’électrons.
couver. Dans les cellules métaboliquement actives, le système de transport d’électrons de la membrane plasmique transfère les électrons du NADH intracellulaire au réactif de couplage d’électrons extracellulaire, réduisant le colorant imperméable aux cellules WST-1 en formazan stable, jaune foncé et soluble dans l’eau.
Après l’incubation, secouez la plaque pour répartir uniformément le formazan et transférez-le dans une plaque multi-puits.
À l’aide d’un lecteur de microplaques, mesurez l’absorbance du formazan, indicateure de la viabilité des tissus.
Une diminution de l’absorba
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