Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:34 min • July 8th, 2025
Prenez un verre de protection chambré contenant des mastocytes – des cellules immunitaires avec des granules sécrétoires, ou SG, contenant des médiateurs inflammatoires.
Ajoutez des anticorps IgE avec un rapporteur fluorescent sensible au pH et incuber.
Les anticorps se lient aux récepteurs Fc des mastocytes. Les rapporteurs sont internalisés par pinocytose, et les endosomes qui en résultent fusionnent avec les SG.
Retirez le support. Ajouter un antigène contenant plusieurs épitopes de liaison aux IgE ; Placez la lame sous un microscope à fluorescence et appliquez la longueur d’onde d’excitation requise.
Le pH acide des SG éteint la fluorescence du rapporteur.
L’antigène se lie aux complexes de récepteurs IgE à la surface de la cellule, les réticulant.
L’agrégation des récepteurs médiée par l’antigène déclenche la migration des SG vers la membrane plasmique.
Lesprotéines SNARE sur le plasma et la membrane SG médient la fusion membranaire et la décharge de la cargaison SG, appelée exocytose.
Le pH plus élevé du milieu provoque l’alcalinisation SG, induisant les rapporteurs à retrouver la fluorescence.
Les SG entrants fusionnent avec les systèmes à membrane fusionnée. L’alcalinisati
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques