Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 4:38 min • July 8th, 2025
Prenez une colonne de chromatographie d’exclusion stérique remplie d’une matrice inerte de particules de résine polysaccharide. Les particules poreuses ont une taille de pore définie.
Rincez la colonne avec un tampon d’équilibrage pour une purification optimale.
Ajoutez un filtrat de culture concentré traité à partir d’une culture de Mycobacterium tuberculosis - une bactérie pathogène. Le filtrat contient des vésicules extracellulaires, ou VE, et d’autres protéines solubles sécrétées par les bactéries.
Les VE sont de petites structures sphériques de taille hétérogène. Ils contiennent des macromolécules et des facteurs de virulence enfermés dans une bicouche lipidique.
L’échantillon pénètre dans la matrice sous l’effet de la gravité. Ajoutez la mémoire tampon pour permettre le déplacement de l’échantillon dans la colonne.
Les VE ne peuvent pas pénétrer dans la résine en raison de la petite taille des pores et se déplacent plutôt dans l’espace interparticulaire, parcourant un chemin plus court et s’échappant en premier.
Les protéines, de plus petite taille, pénètrent dans les pores, parcourent un chemin plus long à travers la résine et s’éluent à la fin.
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