Une technique zWEDGI pour visualiser les larves de poisson-zèbre infectées par des agents pathogènes fongiques

Commencez par des larves de poisson-zèbre transgéniques exprimant des cellules immunitaires marquées par fluorescence marquées avec des marqueurs fluorescents uniques pour un suivi précis.

Les larves sont pré-injectées avec une protéine fluorescente rouge exprimant les spores d’Aspergillus, dans leur cerveau postérieur.

Dans le cerveau postérieur, les spores fongiques imitent l’inflammation locale et attirent les cellules immunitaires, y compris les macrophages, qui phagocytent les spores pour leur élimination.

Tandis que quelques spores persistent et germent en hyphes, libérant des molécules dérivées d’agents pathogènes et attirant les neutrophiles vers le site d’infection.

Transférez une larve anesthésiée dans la chambre de chargement contenant le milieu du dispositif de blessure et de piégeage du poisson-zèbre pour la croissance et l’imagerie, ou zWEDGI, interconnecté à la chambre de blessure via un canal de restriction.

Fixez la larve dans le canal de restriction dans une orientation dorsale-latérale pour l’imagerie du cerveau postérieur.

Dans les premiers stades, la fluorescence rouge représente les spores fongiques, tandis que la fluorescence verte confirme le recrutement des