Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 3:45 min • July 8th, 2025
Prenez un mélange de différents ensembles de microsphères - ou de billes de polystyrène de la taille d’un micron.
Chaque ensemble est couplé à un antigène unique d’un agent pathogène environnemental et est marqué par fluorescence de manière unique.
Ajoutez le mélange dans une plaque filtrante contenant une membrane au fond.
Introduire de la salive humaine contenant des anticorps contre les agents pathogènes environnementaux, qui se lient à des antigènes apparentés sur les microsphères.
Éliminer les anticorps non liés par le vide. Les anticorps liés aux microsphères sont conservés en raison de la petite taille des pores de la membrane.
Ajoutez des anticorps secondaires biotinylés pour se lier aux anticorps liés à la microsphère. Retirez les anticorps non liés.
Ajoutez de la streptavidine conjuguée à un colorant rapporteur fluorescent, qui se lie à la biotine sur les anticorps secondaires.
Retirez le colorant non lié, remettez les microsphères en suspension et passez-les dans un analyseur d’immunodosage multiplex.
Un faisceau laser détecte la fluorescence de la microsphère, identifiant l’antigène, tandis qu’un autre faisceau détecte le signal rapporteur, confirmant la présence d’un a
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