Quantification des niveaux de médiateurs immunitaires dans le liquide de la muqueuse humaine
Encyclopédie des expériences JoVE
Immunologie
0 vues • 2:55 min • July 8th, 2025
Décongelez les papiers-filtres contenant le liquide de muqueuse nasale absorbé sur de la glace pour éviter la dégradation de l’échantillon.
Le liquide comprend des médiateurs immunitaires, notamment des chimiokines et des cytokines.
Plongez les papiers filtres dans un tampon. Transférez le contenu dans des filtres tubulaires. Centrifugeuse pour éluer le liquide de la muqueuse du papier filtre.
Ajoutez l’extrait nasal filtré à la plaque de dosage avec un ensemble d’anticorps de capture spécifiques au médiateur.
Les médiateurs immunitaires se lient à leurs anticorps correspondants.
Introduire des anticorps de détection marqués avec un complexe de ruthénium, qui se lient à leurs médiateurs respectifs.
Ajoutez un tampon à base de tris contenant de la tripropylamine, ou TPA.
Lorsqu’un potentiel est appliqué à travers les électrodes, le complexe de ruthénium et le TPA subissent une oxydation.
Le radical TPA qui en résulte excite le complexe de ruthénium.
En revenant à son état fondamental, le complexe de ruthénium émet des photons.
L’intensité lumineuse mesurée est proportionnelle à la concentration de médiateurs immunitaires spécifiques dans le liquide de la muqueuse.
Pour quantifier le
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